飛諾美色譜柱是高效液相分離系統(tǒng)的中重要的環(huán)節(jié)，業(yè)內(nèi)常把色譜柱比喻為液相色譜的心臟，其根據(jù)極性分為正相柱和反相柱。正相柱大多以硅膠為主，反相柱填料主要以硅膠為基質(zhì)。

　　在使用飛諾美色譜柱的過程中應(yīng)當(dāng)注意的問題：

　　1、避免直接改變?nèi)軇┑慕M成

　　在需要改變檢測樣品溶液組成是，應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成，特別是反相色譜中，不應(yīng)直接從有機(jī)溶劑改變?yōu)槿渴撬?，反之亦然。且在使用次洗脫能力?qiáng)的 洗脫液沖洗時(shí)，對流路系統(tǒng)中流動相的置換應(yīng)以相混溶的溶劑逐漸過渡，每種流動相的體積應(yīng)是柱體積的20倍左右，即常規(guī)分析需要50~75ml。

　　2、避免壓力和溫度的急劇變化

　　溫度的突然變化或者使飛諾美色譜柱從高處掉下都會影響柱內(nèi)的填充狀況；柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內(nèi)填料，因此在調(diào)節(jié)流速時(shí)應(yīng)該緩慢進(jìn)行，以保持柱內(nèi)填料的穩(wěn)定性。

　　3、避免色譜柱反沖

　　一般來說不能反沖，只有使用說明書上標(biāo)明該柱可反沖才可以反沖除去留在柱頭上的雜質(zhì)。否則，會影響是迅速降低柱效。

　　4、禁止樣品未經(jīng)處理直接進(jìn)入

　　避免將基質(zhì)復(fù)雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內(nèi)，需要對樣品進(jìn)行預(yù)處理或者在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接一保護(hù)柱。保護(hù)柱一般是填有相似固定相的短柱，保護(hù)柱可以而且應(yīng)該經(jīng)常更換。

　　5、避免流動相使用不當(dāng)而破壞固定相

　　選擇使用適宜的流動相（尤其是pH），以避免固定相被破壞。有時(shí)可以在進(jìn)樣器前面連接一段預(yù)柱，分析柱是鍵合硅膠時(shí)，預(yù)柱為硅膠，可使流動相在進(jìn)入分析柱之前預(yù)先被硅膠"飽和"，避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。

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